КАЛЬЦИЙ АРСЕНАЗО АГАТ

Инструкция для печати (в формате pdf)

НАЗНАЧЕНИЕ 

Набор предназначен для количественного колориметрического определения концентрации кальция в сыворотке крови и моче человека по реакции с 2,7-бис (арсенофенилазо)-1,8-дигидрокси-3,6-нафтален дисульфо кислотой (арсеназо-III) в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-исследовательской практике. 

Набор рассчитан на проведение 100 определений при расходе 2,0 мл монореагента на один анализ.

Кальций образует с красителем арсеназо-III в щелочных условиях окрашенный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации кальция в анализируемом образце и измеряется фотометрически при 650 (620–670) нм. Для исключения влияния ионов магния, содержащегося в сыворотке, в монореагент включен 8-оксихинолин сульфат.

1. Монореактив (арсеназо III – 80 мг/л; 8-оксихинолинсульфат – 1,13 г/л; натрий тетраборнокислый – 3,5 г/л; тритон Х-100 – 0,5 г/л), 100 мл – 2 флакона.

2. Калибровочный раствор кальция (кальций – 2,5 ммоль/л; магний – 1,5 ммоль/л; соляная кислота – 10 ммоль/л), 5 мл – 1 флакон.

Линейная область определения концентрации кальция – в диапазоне от 1,0 до 3,7 ммоль/л, отклонение от линейности – не более 5%.

Чувствительность определения – не более 0,5 ммоль/л.

Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 5%.

Нормальные величины концентрации кальция составляют:

– в сыворотке крови      2,0–2,6 ммоль/л;

– в моче                          2,5–6,2 ммоль/сутки.

Качество набора можно оценивать по контрольным сывороткам отечественного или зарубежного производства, аттестованным данным методом.

Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.

При работе с набором необходимо соблюдать правила техники безопасности, рекомендуемые при работе с кровью в соответствии с «Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебных и профилактических учреждений», утвержденной Минздравом СССР 17.01.91 г., и «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (М., 1981 г.).

При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

Монореагент содержит 8-оксихинолин сульфат и арсеназо-III. В случае его попадания на кожу и слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством проточной воды. Пипетирование per os категорически запрещается. При попадании внутрь следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.

Остальные компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.

– Спектрофотометр, длина волны 650 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 620–670 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм;

– одноразовые пластиковые пробирки вместимостью 5 мл;

– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 и 2,0 мл;

– секундомер;

– перчатки резиновые или пластиковые.

Негемолизированная сыворотка, гепаринизированная плазма крови, моча.

Все растворы готовы к употреблению. Хранить после вскрытия плотно укупоренными не более 3 месяцев при +2–8° С, но не более срока годности набора.

Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 1.

Таблица 1

Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать в течение 10 минут при комнатной температуре (+18–25° С). После окончания инкубации измерить величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 650 (620–670) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм. Окраска устойчива в течение 1 часа после окончания инкубации.

Концентрацию кальция рассчитать по формуле:

   Eо

С = ----------- x  2,5 ,

   Eк

где: С  – концентрация кальция в опытной пробе, ммоль/л;

Eо – оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;

Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;

2,5 – концентрация кальция в калибровочном растворе, ммоль/л.

Примечание: При использовании кювет другого объема расход реагентов может быть пропорционально изменен с сохранением соотношения объема анализируемого образца к объему монореагента 1:100. 

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25 °С не более 30 суток. 

Срок годности набора – 2 года.

Калибровочный раствор кальция и монореагент после вскрытия флаконов могут храниться в укупоренном виде при температуре +2–8° С в течение 3 месяцев, но не более срока годности набора.

Лабораторная посуда, используемая при измерениях, не должна содержать следов кальция.

Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым – зав. лабораторией ГНЦ РАМН, В.В. Гладуном – главным технологом ООО «Агат-Мед», к.х.н. Г.Н. Кольцовой – ст. научн. сотрудником ГНЦ РАМН.