ГЛЮКОЗА auto 200

ИНСТРУКЦИЯ

Набор предназначен для количественного колориметрического определения концентрации глюкозы в сыворотке и плазме крови и моче человека глюкозооксидазным методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 200 определений при расходе 1,0 мл рабочего раствора на один анализ.

Глюкозоксидаза окисляет D-глюкозу до глюкуроновой кислоты с образованием перекиси водорода; последняя под действием пероксидазы реагирует с 4 аминоантипирином и фенолом с образованием соединения красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации глюкозы в анализируемом образце и измеряется фотометрически при длине волны 504 (490–550) нм.

1. Монореагент (фенол — 0,1 г/л, калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный — 274 г/л, калий фосфорнокислый однозамещенный — 110 г/л, 4-аминоантипирин — 0,075 г/л, глюкозооксидаза — 6000 МЕ, пероксидаза — 600 МЕ), 100 мл — 2 флакона;

2. Калибровочный раствор глюкозы (глюкоза, 10 ммоль/л, бензойная кислота — 1,5 г/л), 1,5 мл — 1 флакон.

Линейная область определения концентрации глюкозы — в диапазоне от 2 до 20 ммоль/л, отклонение от линейности — не более 5%.

Чувствительность определения — не более 1 ммоль/л.

Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 5%.

Нормальные величины концентрации глюкозы составляют: — для сыворотки крови и плазмы крови 3,9–6,1 ммоль/л; — для цельной крови 3,3–5,5 ммоль/л; — для мочи не более 0,5 ммоль/л.

Влияние: присутствие в образце физиологических концентраций мочевой кислоты, аскорбиновой кислоты билирубина и креатинина не влияют на качество определения.

Контроль качества: качество набора можно оценивать по контрольным сывороткам отечественного или зарубежного производства, аттестованным данным методом. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.

Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. При работе с сывороткой или плазмой крови необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в лаборатории, т.к. образцы человеческой крови следует рассматривать как потенциально инфицированые.

— Спектрофотометр, длина волны 504 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 490–550 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм;

— пипетки, позволяющие отбирать объем жидкости 0,01 и 1,0 мл;

— секундомер;

— вода дистиллированная;

— перчатки резиновые или пластиковые.

Негемолизированная сыворотка или плазма крови, моча.

Монореагент и калибровочный раствор глюкозы готовы к применению.

Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 1. 

Таблица 1

Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать в течение 10 минут при температуре +37° С или в течение 15 минут при комнатной температуре (+18–25° С). После окончания инкубации измерить величину оптической плотности калибровочной и опытных проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 504 (490–550) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 или 5 мм. Окраска устойчива в течение 1 часа после окончания инкубации.

Концентрацию глюкозы рассчитать по формуле:

где: С — концентрация глюкозы в опытной пробе, ммоль/л;

       Eо — оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;

       Eк — оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;

       10 — концентрация глюкозы в калибровочном растворе, ммоль/л.

Примечание: при использовании кювет другого объема расход реагентов может быть пропорционально изменен с сохранением соотношения объема анализируемого образца к объему рабочего раствора 1:100.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8 ° С в течение всего срока годности. Допускается замораживание при транспортировке или хранении набора. Замерший монореагент нагреть до комнатной температуры, тщательно перемешать и использовать как обычно. Срок годности набора — 1 год. Калибровочный раствор глюкозы после вскрытия флакона может храниться в укупоренном виде при температуре +2–8 ° С не более 3 месяцев. При получении значений концентрации глюкозы выше 20 ммоль/л анализируемый образец необходимо развести дистиллированной водой в соотношении 1:1, повторить анализ и полученный результат умножить на 2. Инструкцию по применению набора под автоматические биохимические анализаторы высылаются по запросу.

Инструкция составлена: В.В. Гладуном — главным технологом ООО «Агат-Мед», к.б.н. И.В. Смирновым — зав. лабораторией ГНЦ РАМН.