Клиническая биохимия Агат
(495) 777-41-92
  • Разработка, производство и реализация диагностических наборов, контрольных материалов для клинической биохимии.
  • Снабжение лечебных учреждений реактивами, расходными материалами и оборудованием.
Прайс-лист

АЛЬФА-АМИЛАЗА АГАТ

ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реактивов для определения активности альфа-амилазы в биологических жидкостях амилокластическим методом (по Каравею) 

НАЗНАЧЕНИЕ 
Диагностический набор предназначен для количественного определения α-амилазы в биологических жидкостях в клинико-диагностических и биохимических лабораториях. Набор рассчитан на 100 определений, включая контрольные и холостые, при расходе 0,5 мл субстратно-буферного раствора на один анализ. 

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
α-Амилаза гидролизует крахмал с образованием конечных продуктов, не дающих цветной реакции с йодом. При взаимодействии крахмала с йодом образуется окрашенный комплекс, оптическая плотность которого при 640 нм пропорциональна концентрации негидролизованного крахмала. Активности α-амилазы оценивают по уменьшению интенсивности окраски.

СОСТАВ НАБОРА
1. Буферный раствор, 96 мл — 1 флакон;
2. Раствор крахмал-субстрата, 10 мг/мл, 4 мл — 1 флакон;
3. Раствор йода 0,1 Н, 10 мл — 1 флакон;
4. Раствор соляной кислоты 1 Н, 80 мл — 1 флакон. 

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Линейность: в интервале от 3,0 до 36,0 мг/(сґл).
Воспроизводимость: коэффициент вариации — не более 10%.
Нормальные величины:
     — в сыворотке (плазме) крови 3,3–8,9 мг/(сґл);
     — в моче до 44 мг/(сґл);
     — в дуоденальном содержимом 1,7–4,4 г/(сґл).
Диапазон нормальных величин рекомендуется уточнять в каждой лаборатории. 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Раствор соляной кислоты 1 Н — едкое вещество. В случае попадания раствора на кожу и (или) слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством воды. Пипетирование per os категорически запрещается. Другие компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. При работе с сывороткой или плазмой крови необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в лаборатории, т.к. образцы человеческой крови следует рассматривать как потенциально инфицированые.

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
— Спектрофотометр, длина волны 640 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 600–700 нм (красный светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
— водяной термостат, поддерживающий температуру 37° С;
— пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,01; 0,50; 1,0 и 4,0 мл;
— секундомер;
— цилиндры мерные или кобы вместимостью 25; 100 и 1000 мл;
— пробирки вместимостью 5–10 мл;
— вода дистиллированная;
— перчатки резиновые или пластиковые. 

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Свежая сыворотка или ЭДТА — плазма крови. Гемолиз не влияет на активность фермента. Свежая моча или дуоденальное содержимое, предварительно разведенное физиологическим раствором хлорида натрия в 100 раз. 

ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
1. Субстратно-буферный раствор. Смешать буферный раствор и раствор крахмал-субстрата в соотношении 24:1. Субстратно-буферный раствор стабилен в течение 15 дней при температуре 2–8° С.
2. Раствор йода 0,01 Н. Получают разведением 0,1 Н раствора йода дистиллированной водой в 10 раз. Раствор готовят ежедневно.
3. Раствор соляной кислоты 0,1 Н. Содержимое флакона с 1 Н раствором соляной кислоты разводят дистиллированной водой до объема 800 мл. Раствор стабилен. 

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
В пробирки вносят реактивы по следующей схеме:

Определяют оптическую плотность холостой и опытной проб при 640 нм (600–700 нм, красный светофильтр) относительно дистиллированной воды в кювете с толщиной слоя 10 мм. Окраска стабильна в течение 10 мин. Активность α-амилазы выражают в миллиграммах или граммах крахмала, гидролизованного 1 л исследуемого образца за 1 с инкубации при 37° С. 

РАСЧЕТЫ
Расчет активности α-амилазы производят по формуле:

                                 Dх — Dо
Активность, мг/(схл)  =    ------------------    х 44,4 х К  ,
                              Dх

где: Dх — оптическая плотность холостой пробы;
       Dо — оптическая плотность опытной пробы;
       К — коэффициент разведения образца (если он был разведен).

1 мг/(схл) = 3,6 мг/(часхмл); 1 мг/(часхмл) = 0,278 мг/(схл)

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Срок годности набора — 2 года.

По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться по адресу: 105173, г. Москва, ул. Западная, д. 2, стр. 1, ООО «Агат—Мед». Телефон для справок: (495) 777-41-92.

Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым — зав. лабораторией ГНЦ РАМН, В.В. Гладуном — главным технологом ООО «Агат-Мед».

Назад к списку инструкций

Производство Агат-Мед
  • Контрольная сыворотка Биоконт-С

    Контрольная сыворотка Биоконт-С

    Информация
    Зарегистрированная сухая контрольная сыворотка промышленного производства
  • Масло иммерсионное

    Масло иммерсионное для микроскопии

    Информация
    Тип А (классическое) и тип Б (профессиональное) пониженной вязкости
  • ГЕМОГЛОБИН-КОНТРОЛЬ

    Стабилизированный концентрированный раствор гемоглобина и контрольные материалы на его основе

    Информация
    25 параметров аттестации перекрывают весь спектр анализов крови.