ГЕМИХРОМ АГАТ
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения гемоглобина в крови гемихромным методом
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения содержания гемоглобина в крови гемихромным в клинико-диагностических и биохимических лабораториях. Набор рассчитан на проведение 1000 определений при расходе 5,0 мл рабочего раствора на один анализ.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Гемоглобин крови под действием поверхностно-активного вещества додецилсульфата натрия переходит в низкоспиновую окисленную форму — гемихром, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется фотометрически при длине волны 540 (500–560) нм.
СОСТАВ НАБОРА
1. Трансформирующий реагент, концентрат — (натрий додецилсульфат, 60 г/л) — 5 флаконов (по 10 мл).
2. Калибровочный раствор гемоглобина с концентрацией 120 г/л — 1 флакон (2 мл).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Линейная область определения концентрации гемоглобина — в диапазоне от 20 до 200 г/л, отклонение от линейности — не более 2%.
Чувствительность определения — не более 10 г/л.
Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 2%.
Нормальные величины концентрации гемоглобина в крови составляют: — у мужчин 130–160 г/л; — у женщин 120–140 г/л. Качество набора можно оценивать с использованием контрольных растворов гемоглобина отечественного или зарубежного производства. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. При работе кровью и ее компонентами необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в лаборатории, т.к. образцы человеческой крови следует рассматривать как потенциально инфицированные.
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
— Спектрофотометр, длина волны 540 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 500–560 нм (зеленый светофильтр), кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
— пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 и 5,0 мл;
— колба мерная вместимостью 1,0 л;
— пробирки вместимостью 5–10 мл;
— секундомер; — вода дистиллированная;
— перчатки резиновые или пластиковые.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
Трансформирующий раствор. Содержимое одного флакона концентрата трансформирующего реагента количественно перенести в мерную колбу вместимостью 1,0 л и довести объем дистиллированной водой до метки. Допускается выпадение кристаллов додецилсульфата натрия в концентрате трансформирующего реагента при хранении. Выпавший осадок можно растворить, подогрев концентрат в горячей воде, либо он полностью раствориться при количественном переносе в мерную колбу. Если рабочий раствор трансформирующего реагента не становиться прозрачным после растворения концентрата в течение часа, то такой раствор не пригоден к применению.
Калибровочный раствор гемоглобина готов к применению.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
В пробирки внести по 5,0 мл трансформирующего раствора, добавить по 0,02 мл крови (разведение в 251 раз), тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 20 минут, после чего измерить величину оптической плотности опытных проб против холостой пробы (трансформирующего раствора) при длине волны 540 (500–560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Калибровочный раствор гемоглобина обрабатывать так же, как и пробу цельной крови. Окраска устойчива в течение 1 часа. Концентрацию гемоглобина в крови рассчитать по формуле:
Eо
С = ------------------ х 120 ,
Eк
где: С — концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л;
Eо — оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;
Eк — оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;
120 — концентрация гемоглобина в калибровочном растворе, г/л.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25° С не более 5 суток.
Срок годности набора — 2 года.
Трансформирующий раствор должен быть прозрачным и может храниться при комнатной температуре не более 1 месяца. При появлении осадка раствор непригоден для употребления.
Калибровочный раствор гемоглобина после вскрытия флакона может храниться в течение 6 месяцев, но не более срока годности набора, при хранении в укупоренном виде при температуре +2–8° С.
По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться по адресу: 105173, г. Москва, ул. Западная, д. 2, стр. 1, ООО «Агат—Мед». Телефон для справок: (495) 777-41-92.
Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым — ст.н.с. Гематологического научного центра РАМН.
Назад к списку инструкций