Клиническая биохимия Агат
(495) 777-41-92
  • Разработка, производство и реализация диагностических наборов, контрольных материалов для клинической биохимии.
  • Снабжение лечебных учреждений реактивами, расходными материалами и оборудованием.
Прайс-лист

ГЕМОГЛОБИН AHD АГАТ


Инструкция для печати (для печати pdf)

ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов
для определения гемоглобина в крови AHD методом

НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения содержания общего гемоглобина в крови AHD-методом (щелочной гематин-детергент) в клиникодиагностических и биохимических лабораториях. Набор рассчитан на проведение 330 определений при расходе 3,0 мл рабочего раствора на один анализ.

ПРИНЦИП МЕТОДА
Гемоглобин крови в щелочной среде высвобождает гем, который в виде гематина образует с неионным детергентом Triton X100® устойчивый комплекс оливкового цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации гемоглобина в крови и измеряется фотометрически. Щелочной гематин-детергент (alkaline haematin detergent, AHD) комплекс имеет максимум оптической плотности при 575 нм, но может быть измерен в широком диапазоне длин волн (от 540 до 620 нм), в том числе и с использованием светофильтров 540, 546, 570, 578 нм. AHD-реагент относится к трансформирующим реагентам, то есть в единую форму щелочного гематин-детергента преобразуются все формы гемоглобина крови. Реакция образования комплекса заканчивается менее чем за 5 минут. Полученный комплекс несветочувствителен и стабилен длительное время. Стромы эритроцитов, другие клеточные элементы крови, хиломикроны, небольшие сгустки крови растворяются в AHD-реагенте и не вносят ошибки в измерение гемоглобина. Метод особенно пригоден для автоматизированных систем анализа. Реагент не содержит цианида.

СОСТАВ НАБОРА
1. Концентрат AHD-реагента, (100 мл) – 1 флакон.
2. Калибровочный раствор гемоглобина с концентрацией 120 г/л,
(2 мл) – 1 флакон.

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Линейная область определения концентрации гемоглобина – в диапазоне от 20 до 200 г/л, отклонение от линейности – не более 2%.
Чувствительность определения – не более 10 г/л.
Воспроизводимость: коэффициент вариации не более 2%.
Нормальные величины концентрации гемоглобина в крови составляют:

– у мужчин 130–160 г/л;
–  у женщин 120–140 г/л.

Качество набора можно оценивать с использованием контрольных растворов гемоглобина отечественного или зарубежного производства. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин у обследуемого контингента. 


МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Концентрат АНD-реагента содержит щелочь, едкое вещество. В случае попадания раствора на кожу и (или) слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством воды. Другие компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. При работе с набором необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в лаборатории при работе с кровью. Образцы человеческой крови следует рассматривать как потенциально инфицированные.

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
– Спектрофотометр, длина волны 575 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 540–620 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
– пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 мл и 3,0 мл;
– колба мерная вместимостью 1,0 л;
– пробирки вместимостью 5–10 мл;
– секундомер;
– вода дистиллированная;
–  перчатки резиновые или пластиковые.

ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
AHD-реагент. Один флакон концентрата AHD-реагента количественно перенести
в мерную колбу вместимостью 1,0 л, довести объем дистиллированной
водой до метки и тщательно перемешать. Калибровочный раствор гемоглобина готов к применению.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
В пробирки внести по 3,0 мл AHD-реагента, добавить по 0,02 мл крови (разведение в 151 раз), тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 5 минут, после чего измерить величину оптической плотности опытных проб против холостой пробы (AHD-реагента) при длине волны 575 (540–620) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Калибровочный раствор гемоглобина обрабатывать так же, как и пробу цельной крови. Окраска устойчива в течение 1 часа. Концентрацию гемоглобина в крови рассчитать по формуле:

           Eо
С = ------------  х 120 ,
            Eк

 где: С – концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л;
        Eо – оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;
        Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;
       120 – концентрация гемоглобина в калибровочном растворе, г/л.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре до +25° С не более 5 суток. 

Срок годности набора – 2 года.

AHD-реагент может храниться в плотно укупоренной пластиковой посуде при комнатной температуре (+18–25° С) в течение 1 года, но не более всего срока годности набора. Калибровочный раствор гемоглобина после вскрытия флакона может храниться в течение 6 месяцев, но не более срока годности набора, при хранении в укупоренном виде при температуре +2–8° С. 

По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться по адресу: 105173, г. Москва, ул. Западная, д. 2, стр. 1, ООО «Агат–Мед». Телефон для справок: (495) 777-41-92. 

Инструкция составлена: к.б.н. И.В. Смирновым – ст.н.с. Гематологического научного центра РАМН, Гладуном В.В., сотрудником ООО «Агат–Мед».

Назад к списку инструкций

Производство Агат-Мед
  • Контрольная сыворотка Биоконт-С

    Контрольная сыворотка Биоконт-С

    Информация
    Зарегистрированная сухая контрольная сыворотка промышленного производства
  • Масло иммерсионное

    Масло иммерсионное для микроскопии

    Информация
    Тип А (классическое) и тип Б (профессиональное) пониженной вязкости
  • ГЕМОГЛОБИН-КОНТРОЛЬ

    Стабилизированный концентрированный раствор гемоглобина и контрольные материалы на его основе

    Информация
    25 параметров аттестации перекрывают весь спектр анализов крови.